2008 年生物选修 3 模块考查内容总结1 基因工程的诞生（识记）基础理论：DNA 是遗传物质；DNA 双螺旋结构和中心法则的确立；遗传密码的破译技术支持：基因转移载体的发现；工具酶的发明；DNA 体外重组的实现；重组 DNA 表达实验的成功2 基因工程的原理及技术（识记）（1）基因重组的基本工具：·限制性核酸内切酶（限制酶）：主要从原核生物中分离纯化出来，这种酶在原核生物中的作用是防止外来病原物的侵害，将外源 DNA 切割保证自身安全它能识别 DNA 分子的某种特定核苷酸序列，并切割两个核苷酸之间的磷酸二酯键，产生的末端有黏性末端（如 EcoRⅠ 切割的末端）和平末端·DNA 连接酶：EcoliDNA 连接酶连接黏性末端的 DNA 片断；T4DNA 连接酶黏性末端和平末端都可以连接；而 DNA 聚合酶是将单个的脱氧核苷酸加到 DNA 片断上。·载体：种类有质粒（常用，并被人工改造）、动植物病毒；条件：能自我复制；有一个或多个酶切位点；有标记基因位点；对受体细胞无害（2）基因工程的基本操作程序：·目的基因的获取：概括地说，主要有两条途径：一条是从供体细胞的 DNA 中直接分离基因；另一条是人工合成基因。直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”，又叫“散弹射击法”。这种方法犹如用猎枪发射的散弹打鸟，无论哪一颗弹粒击中目标，都能把鸟打下来鸟枪法的具体做法是：用限制酶将供体细胞中的 DNA 切成许多片段，将这些片段分别载入运载体，然后通过运载体分别转入不同的受体细胞，让供体细胞所提供的 DNA(外源 DNA)的所有片段分别在各个受体细胞中大量复制(在遗传学中叫做扩增)，从中找出含有目的基因的细胞，再用一定的方法把带有目的基因的 DNA 片段分离出来。如许多抗虫、抗病毒的基因都可以用上述方法获得。用“鸟枪法”获取目的基因的缺点是工作量大，具有一定的盲目胜。又由于真核细胞的基因含有不表达的 DNA 片段，不能直接用于基因的扩增和表达，因此，在获取真核细胞中的目的基因时，一般是用人工合成基因的方法。目前人工合成基因的方法主要有两条途径。一条途径是以目的基因转录成的信使 RNA 为模板，反转录成互补的单链 DNA，然后在酶的作用下合成双链 DNA，从而获得所需要的基因。另一条途径是根据已知的蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的信使 RNA 序列，然后按照碱基互补配对原则，推测出它的结构基因的核苷酸序列，再通过化学的方法，以单核苷酸为原料合成目的基因。如人的血红蛋白基因、...
