四川省岳池县第一中学2014-2015学年高中生物 专题5 课题3 第1课时 多聚酶链式反应扩增DNA片段学案 新人教版选修1

血红蛋白的提取和分离学习目标1. 尝试对血液中血红蛋白的提取和分离。2. 提取生物大分子的基本过程和方法。3. 了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。学习重点凝胶色谱法的原理和方法。学习难点样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填。第 1 课时课前预习使用说明与学法指导1、结合初中知识蛋白质的性质。2、掌握凝胶色谱法的原理缓冲液的作用以及电泳的相关知识。知识准备 分离生物大分子的基本思路教材助读1.凝胶色谱法凝胶色谱法又称作 ，是根据 分离蛋白质的有效方法。凝胶实际上是由 构成的多孔球体，在小球内部有许多贯穿的通道，相对分子质量不同的蛋白质分子通过凝胶的速度不同。相对分子质量较小蛋白质 进入凝胶内部的通道，路程 ，移动速度 ；而相对分子质量较 蛋白质 无法进入凝胶内部的通道，只能在 移动，路程 ，移动速率 。2.缓冲液缓冲液的作用是： 。3.电泳电泳是指 。电泳利用待分离样品中个分子 以及分子本身 、 的不同，使带电分子产生不同的 ， 从 而 实 现 样 品 中 各 种 分 子 的 分 离 。 两 种 常 用 的 电 泳 方 法 分 别 是 和 。在测定蛋白质分子量是一般用 。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率取决于 以及 等因素。知识注解 （一）凝胶色谱法1.概念 被分离的蛋白质相对分子质量的大小，利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用，来进行分离。2.凝胶 多数凝胶是由多糖类化合物（如葡聚糖或琼脂糖）构成的多孔小球体，内部有许多贯穿的通道。3.原理 ①、当相对分子量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢。②、而相对分子量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。③、依据的特性是：蛋白质分子量的大小。（二）缓冲溶液1.概念：在在一定的范围内，凡是能够抵制外加少量强酸或强碱的影响使原来溶液 PH 值基本保1持不变的混合溶液。2.作用:能够抵制外界的酸和碱对溶液 PH 值的影响，维持 PH 基本不变。在本课题中使用的缓冲液是:磷酸缓冲液，目的是:利用缓冲液模拟细胞内的 PH 环境，保证血红蛋白的正常结构和功能，便于观察(红色)和科学研究(活性)。（三） 电泳1.概念：带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。2.原理 ：①、许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的...