Lab3双层琼脂扩散法筛选抗菌活性菌株应用护理课件目录CONTENTS•双层琼脂扩散法介绍•抗菌活性菌株筛选过程•Lab3双层琼脂扩散法的实验步骤•抗菌活性菌株的应用护理•Lab3双层琼脂扩散法的实验注意事项01CHAPTER双层琼脂扩散法介绍双层琼脂扩散法是一种通过在琼脂培养基中插入带有抗菌药物的纸片，观察抑菌圈大小的方法，用于筛选具有抗菌活性的菌株。原理基于不同菌株对药物的敏感程度不同，在药物纸片周围形成不同的抑菌圈。通过测量抑菌圈的直径，可以评估菌株对抗菌药物的敏感性。双层琼脂扩散法的原理0102双层琼脂扩散法的应用范围可用于临床实验室、兽医实验室、食品工业等领域，对病原菌进行快速检测和抗菌药物敏感性评估。适用于各种细菌的抗菌药物敏感性试验，如革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、厌氧菌等。操作简便、快速、成本低廉，可同时检测多种抗菌药物，适用于大量样品的快速筛选。优点结果受人为因素影响较大，准确性不如其他定量方法，无法准确测定最小抑菌浓度等药理学参数。缺点双层琼脂扩散法的优缺点02CHAPTER抗菌活性菌株筛选过程从不同的环境、生物样本中收集可能具有抗菌活性的菌种。收集具有抗菌活性的菌种采用甘油管藏、滤纸片法、液体石蜡法等保存方法，确保菌种活性。菌种保存方法菌种收集与保存筛选出对常见致病菌具有抗菌活性的菌种。抗菌谱抗菌强度安全性根据抑菌圈大小、透明圈与抑菌圈比例等指标评估抗菌强度。确保筛选出的菌种无毒或低毒，不会对人类健康造成威胁。030201菌种筛选标准在两层琼脂培养基之间接种待测菌种，观察抑菌圈的形成。双层琼脂扩散法在含有待测菌种的培养基中加入指示菌，摇床培养后观察抑菌效果。摇瓶试验通过划线分离待测菌种，观察是否出现透明圈。平板划线法菌种筛选方法使用游标卡尺测量抑菌圈的直径，评估抗菌活性。抑菌圈测量将筛选出的抗菌活性菌株进行抗菌效果比较，选出效果最佳的菌株。抗菌效果比较进行重复实验，验证筛选结果的稳定性和可靠性。重复实验验证筛选结果评估03CHAPTERLab3双层琼脂扩散法的实验步骤实验试剂各种抗菌药物溶液。1.制备双层琼脂培养基按照配方配制琼脂培养基，加热溶解后，将培养基倒入培养皿中，冷却凝固后形成底层琼脂。实验材料双层琼脂培养基、抗菌活性菌株、接种环、恒温培养箱、无菌操作台等。实验准备将各种抗菌药物溶解于适宜溶剂中，制备成一定浓度的抗菌药物溶液。2.制备抗菌药物溶液3.接种菌株4.添加抗菌药物溶液5.培养在无菌操作台中将抗菌活性菌株接种到底层琼脂上，用接种环轻轻划线。将抗菌药物溶液均匀滴加到已接种菌株的底层琼脂上，形成上层琼脂。将培养皿放入恒温培养箱中，保持适宜的温度和湿度，培养一定时间。实验准备3.抗菌药物溶液应准确滴加在上层琼脂上，避免过多或过少。1.所有操作均需在无菌操作台中进行，避免杂菌污染。实验操作注意事项2.接种环在使用前后均需进行灼烧灭菌。4.培养过程中应保持恒温培养箱的温度和湿度稳定。实验操作0103020405在培养一定时间后，观察上层琼脂中抗菌活性菌株的生长情况，记录抑菌圈的大小和形态。根据抑菌圈的大小和形态，分析各种抗菌药物对不同抗菌活性菌株的抑菌效果，为后续的抗菌药物筛选和应用提供依据。实验结果观察与记录结果分析结果观察04CHAPTER抗菌活性菌株的应用护理避免频繁冻融为了保持菌种的活性，应避免频繁冻融。在运输和使用过程中，应尽量减少菌种的冻融次数，以免影响其抗菌活性。低温保存抗菌活性菌株应在-70℃以下的低温条件下保存，以保持其活性。在运输过程中，应使用干冰或液氮等低温物质进行保温，确保菌种活性不受影响。防止污染在保存和运输过程中，应采取措施防止菌种受到污染。使用的容器应密封性好，并定期检查其密封性，以确保菌种的纯度和活性。抗菌活性菌株的保存与运观察与检测在培养过程中，应定期观察菌种的生长情况，并记录生长曲线、抑菌圈等数据。通过检测抗菌活性，评估菌种的抗菌效果。准备培养基在使用抗菌活性菌株之前，需要准备适宜的培养基。根据菌种的不同，选择适合的培养基配方，并进行灭菌处理。接种菌种将保存的抗菌活性菌株按照规定的接种方法接种到培养基中。接...
