基因工程的基本内容(2)第二课时●教学过程[导课]上节课我们学习了基因工程的概念,知道了基因操作的工具,那么有了限制性内切酶、DNA连接酶和运载体等工具后,怎样才能把一种生物的基因放到另一种生物的细胞内
这就是这节课我们要讨论的内容
[教学目标达成]基因操作的基本步骤:大致可以分为四步
然后播放多媒体课件:基因操作的的基本步骤,并提出思考问题:1
进行基因操作一般要经历哪四步
获得目的基因的途径有哪些
怎样将目的基因与运载体结合
在将目的基因导入受体细胞之前,需对受体细胞作何处理
怎样知道受体细胞中是否导入了目的基因
以及目的基因是否完成了表达
指导学生阅读教材后回答问题
学生回答之后教师再纠正
然后师生共同总结得出:基因操作一般要经历目的基因的提取、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测和表达四个步骤
从供体细胞中的DNA分子上直接分离基因最常用的方法是“鸟抢法”
鸟枪法的具体做法是:用限制酶将供体细胞中的DNA切成许多片段,将这些片段分别载入运载体,然后通过运载体分别转入不同的受体细胞,让供体细胞所提供的DNA的所有片段分别在各个受体细胞中大量复制,从中找出含有目的基因的细胞,再用一定的方法把带有目的基因的DNA片段分离出来
人工合成基因的方法有两条途径
一条途径是以目的基因转录的信使RNA为模板,逆转录成互补的单链DNA,然后在酶的作用下合成双链DNA,从而获得所需要的基因
另一条途径是根据已知的蛋白质的氨基酸序列,推测出相应的信使RNA序列,然后按照碱基互补配对原则,推测出它的结构基因的核苷酸序列,再通过化学方法合成目的基因
在将目的基因与运载体结合的过程中需要限制性内切酶和DNA连接酶的作用,用人工方法使体外重组的DNA分子转移到受体细胞,主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径
例如,运载体是质粒、受体细胞是细菌,一般先将细菌用氯