河南省灵宝市 2012-2013 学年高二上学期生物 1.1《DNA 重组技术的基本工具》导学案 新人教版1、简述 DNA 重组技术所需三种基本工具的作用2、认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新【情境导入】如果能让禾本科植物固定空气中的氮气的话，需要用到什么技术？这一技术的原理是什么？操作的对象是什么呢？【学习过程】一、自主学习任务：1、限制性核酸内切酶——“分子手术刀”（1）切割 DNA 的工具是 ，又称 。（2）DNA 分子经限制酶切割产生的 DNA 片段，末端通常有 两种形式，即 和 。例 1、下列关于限制酶的说法正确的是（ ）A、限制酶广泛存在于各种生物中，但微生物中很少B、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列C、不同的限制酶切割 DNA 后都会形成黏性末端D、限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键2、DNA 连接酶——“分子缝合针”根据 DNA 连接酶的来源不同，可以将它分为两类：一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为DNA 连接酶。DNA 连接酶只能将 连接起来，不能将双链 DNA 片段平末端之间进行连接。另一类是从 分离出来的，称为 T4DNA 连接酶。T4DNA 连接酶既可以“缝合”双链 DNA 片段互补的 ，又可以“缝合”双链 DNA 片段的 ，但连接 之间的效率比较低。例 2、下图为 DNA 分子的切割和连接过程。(1)EcoRI 是一种 酶，其识别序列是 ，切割位点是 与 之间的 键。切割结果产生的 DNA 片段末端形式为 。(2)不同来源 DNA 片段结合，在这里需要的酶应是 连接酶，此酶的作用是在 与 之间形成 键，而起“缝合”作用的。还有一种连接平末端的连接酶是 。13、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”（1）基因操作过程中使用载体两个目的：一是用它作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞中去；二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制。（2）现在通常使用的载体是 ，它是一种相对分子质量较小、独立于拟核 DNA 之外的环状 DNA，有的细菌中有一个，有的细菌中有多个。（3）质粒通过细菌间的接合由一个细菌向另一个细菌转移，可以 复制，也可整合细菌拟核 DNA 中，随着拟核 DNA 的复制而复制。（4）其他载体还有 和 等。（5）作为载体必须具备以下条件：能够在宿主细胞中复制并稳定地保存，至少具有一个限 制酶切点，以便与外源基因连接；具有某些标记基因，便于进行筛选，如对抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。例 3、以下是两种限...
