第 15 讲 基因工程和细胞工程★ [最新考纲]1.基因工程的诞生(Ⅰ);2
基因工程的原理及技术(含 PCR 技术)(Ⅱ);3
基因工程的应用(Ⅱ);4
蛋白质工程(Ⅰ);5
植物的组织培养(Ⅱ);6
动物细胞培养与体细胞克隆(Ⅱ);7
细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ);8
DNA 的粗提取与鉴定
精读教材——记一记1.与目的基因相关的两类“检测”(1)标记基因:检测受体细胞中是否含“重组 DNA”或运载体
——在依据标记基因(如四环素抗性基因)制备的特定选择培养基(如加入了四环素的培养基)中能够生存下来的受体细胞才可能含重组 DNA(目的基因+运载体)或运载体
(2)DNA 分子杂交技术(基因探针)检测转基因生物中是否含目的基因、在含有目的基因的DNA 片段上用放射性同位素作标记,制作探针,以此与已提取到的转基因生物基因组 DNA 杂交,若显示出杂交带,则表明目的基因已插入到受体细胞基因组中
(P14正文)2.基因工程的常考点(1)目的基因插入位置:启动子与终止子之间
(2)将目的基因导入受体细胞不发生碱基互补配对
(3)常用的受体细胞① 植物:受精卵、体细胞
② 动物:受精卵
③ 微生物:大肠杆菌、酵母菌等
(4)原核生物作为受体细胞的优点:多为单细胞、繁殖快、遗传物质相对较少
3.动物细胞培养关键点(1)培养基的特有成分:动物血清
(2)培养过程:原代培养、传代培养
(3)两次使用胰蛋白酶:第一次用于制备细胞悬液,开始原代培养,第二次用于处理瓶(壁)上的细胞
4.关注植物细胞工程的几个问题(1)植物细胞 A 和植物细胞 B 杂交获得的杂种细胞有三种类型:AA 型、BB 型、AB 型,符合要求的只有 AB 型,需要进行筛选
(2)杂种细胞形成的标志:新的细胞壁的生成
(3)杂种植株遗传物质的变化:杂种植株的变异类型属于染色体变异,其染色体数通常是两亲本细胞染色体数目之和,杂