第 15 讲 基因工程和细胞工程★ [最新考纲]1．基因工程的诞生(Ⅰ)；2.基因工程的原理及技术(含 PCR 技术)(Ⅱ)；3.基因工程的应用(Ⅱ)；4.蛋白质工程(Ⅰ)；5.植物的组织培养(Ⅱ)；6.动物细胞培养与体细胞克隆(Ⅱ)；7.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)；8.DNA 的粗提取与鉴定。精读教材——记一记1．与目的基因相关的两类“检测”(1)标记基因：检测受体细胞中是否含“重组 DNA”或运载体。——在依据标记基因(如四环素抗性基因)制备的特定选择培养基(如加入了四环素的培养基)中能够生存下来的受体细胞才可能含重组 DNA(目的基因＋运载体)或运载体。(2)DNA 分子杂交技术(基因探针)检测转基因生物中是否含目的基因、在含有目的基因的DNA 片段上用放射性同位素作标记，制作探针，以此与已提取到的转基因生物基因组 DNA 杂交，若显示出杂交带，则表明目的基因已插入到受体细胞基因组中。(P14正文)2．基因工程的常考点(1)目的基因插入位置：启动子与终止子之间。(2)将目的基因导入受体细胞不发生碱基互补配对。(3)常用的受体细胞① 植物：受精卵、体细胞。② 动物：受精卵。③ 微生物：大肠杆菌、酵母菌等。(4)原核生物作为受体细胞的优点：多为单细胞、繁殖快、遗传物质相对较少。3．动物细胞培养关键点(1)培养基的特有成分：动物血清。(2)培养过程：原代培养、传代培养。(3)两次使用胰蛋白酶：第一次用于制备细胞悬液，开始原代培养，第二次用于处理瓶(壁)上的细胞。4．关注植物细胞工程的几个问题(1)植物细胞 A 和植物细胞 B 杂交获得的杂种细胞有三种类型：AA 型、BB 型、AB 型，符合要求的只有 AB 型，需要进行筛选。(2)杂种细胞形成的标志：新的细胞壁的生成。(3)杂种植株遗传物质的变化：杂种植株的变异类型属于染色体变异，其染色体数通常是两亲本细胞染色体数目之和，杂种植株属于异源多倍体。(4)植物组织培养时植物激素和光照的使用① 植物激素的使用：脱分化阶段先使用生长素，后使用细胞分裂素，以促进细胞的分裂；再分化阶段生长素比例较高，以促进根的形成。② 光照的使用：脱分化阶段不需要给予光照，再分化阶段需要给予光照，以利于叶绿素的形成。(5)利用植物组织培养生产细胞产物时，有时只需将外植体培养到愈伤组织，从愈伤组织中获取产物。5．关注制备单克隆抗体的两个常考点(1)三种细胞的特点①B 淋巴细胞：能分泌抗体，不能大量增殖。② 骨髓瘤细胞：能大量增殖，不能分泌抗体。③ 杂交瘤细胞：既能分泌抗体...
