高中生物DNA的粗提取与鉴定教案旧人教必修2目的要求1.了解实验原理。2.学会DNA的粗提取和鉴定的方法,观察提取出来的DNA物质。3.通过本实验培养实验操作能力和观察能力。实验原理1.DNA在NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质的量浓度为0.14mOl/L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。2.DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。注意事项1.步骤3析出含DNA的黏稠物中,蒸馏水要沿烧杯内壁缓缓加入,不能一次快速倒入。2.实验中有多个步骤都要用玻璃棒进行搅拌,但是在不同的步骤中玻璃棒的用法不同。实验用具鸡血细胞液(5~10mL);体积分数为95%的冷酒精,蒸馏水,质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液,物质的量浓度分别为2mol/L和0.015mol/L的NaCl溶液,二苯胺试剂;烧杯(100mL,1个,50mL,500mL,各2个),漏斗,试管(20mL,2个),玻璃棒,滴管,量筒(100mL,1个),纱布,镊子,滤纸,铁架台,铁环,三角架,酒精灯,石棉网,载玻片,试管夹。课时安排一课时课前准备制备鸡血细胞液,方法是:将质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液100mL,置于500mL烧怀中,注入新鲜的鸡血(约180mL),用玻璃棒搅拌,使其充分混合,以免凝血。静置于冰箱内一天,使血细胞自行沉淀。(也可以用离心机离心2min(转速1000转/分)。用吸管吸去上清液。板书:(课前写好)实验十一DNA的粗提取与鉴定实验原理:1.析出溶解在NaC1溶液中的DNA。2.用冷酒精提取出含杂质较少的DNA。3.DNA在沸水浴时被二苯胺染成蓝色。方法步骤:1.提取细胞核物质:顺时针方向搅拌,稍快,稍重。5min2.溶解DNA:3.析出含DNA的黏稠物:蒸馏水300mL,逆时针方向搅拌,缓慢4.过滤:取黏稠物5.再溶解:顺时针方向搅拌,较慢。3min6.过滤:取滤液。7.提取出含杂质较少的DNA,逆时针方向搅拌,稍慢。5min8.DNA的鉴定:沸水浴5min引言:上节课我们通过几个验证性实验,证明了DNA是主要的遗传物质。那么DNA是什么样的物质呢?今天我们就通过实验将它提取出来,进行观察和鉴定。首先请一位同学说一说实验原理。(答:略)问:通过预习,你知道选用什么实验材料?课前准备是怎样做的?(答:鸡血细胞液。制备方法:略。)问:在制备鸡血细胞液时,所用的柠檬酸钠有什么作用?(答:防止血液凝固。)制备过程中,一定要用刚宰杀的鸡的新鲜血,并且要与抗凝剂充分混合,防止凝血。我们采用静置一天的方法,获得鸡血细胞液。下面大家在动手做实验之前先要明确几个需要注意的问题:1.要严格按照实验指导的方法步骤去操作。2.实验中有多个步骤都要用玻璃棒进行搅拌,使用时玻璃棒不要碰到烧杯底,在不同的步骤中玻璃棒的用法不同,每一步的用法参照黑板上的指导去操作。3.在DNA的鉴定中,所用的二苯胺是一种有毒性的试剂,大家在使用时注意不要让药液接触到皮肤或身体的其他部位,也不要近距离观察。下面在实验进行过程中,要思考每一操作步骤要达到什么目的。(教师巡视,指导)在进行步骤1时,利用搅拌的5分钟做如下提问:问:为什么要加蒸馏水?加入蒸馏水后细胞将会怎样?(答:让细胞内溶液的浓度大于周围溶液的浓度,细胞会吸水以至胀破。)问:为什么要用力搅拌?(答:可以加速血细胞和细胞核的破裂。)所以下一步骤过滤将滤去的是细胞膜和核膜等物质。(在进行步骤3时,要向全班明确。)这一步骤是这个实验成败的关键,注意加蒸馏水的方法和使用玻璃棒的方法,千万不能太快太猛,防止打碎DNA。(教师巡视,指导)观察滤取出来的黏稠物的颜色。有的同学提取的黏稠物较少,原因可能是在溶解DNA时不充分,也可能是析出黏稠物时搅拌的快了。(教师巡视,指导)将黏稠物再溶解时一定要充分,多搅拌。以免有DNA损失。(教师巡视,指导。)加入冷酒精时动作要慢。当玻璃棒上出现丝状物缠绕时,继续慢慢搅拌。至不再增加时,取出吸干上面的水分。仔细观察丝状物呈什么颜色?(答:黄色。)这些丝状物要用二...