四川省岳池县第一中学 2014-2015 学年高中生物 专题 5 课题 1 第 2课时 DNA 的粗提和鉴定课前预习学案 新人教版选修 1使用说明与学法指1．回顾 DNA 提取原理与选材2．掌握 DNA 提取过程与纯化及鉴定方法知识准备1．DNA 提取原理与选材2．提取生物大分子的一般思路教材助读一、DNA 的粗提取主要实验步骤（以鸡血红细胞为例）二、提取 DNA 的鉴定1、方法：① 取甲、乙两支试管，并向其中加入 5mL（等量）的 2mol/LNaCl 溶液；② 向甲试管中加入粗提取的 DNA，并搅拌使 DNA 溶解；③ 向两支试管中各加入 4mL（等量）二苯胺试剂，混匀，沸水中加热 5min，待试管冷却后，比较两支试管的颜色（蓝色）变化。2、注意点：实验中需要对照，目的：证明 三、知识注解 1、破碎细胞，释放 DNA动物：在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，使其吸水胀破，达到破碎细胞的目的。加入蒸馏水的同时，要用玻璃棒进行搅拌。1① 破碎细胞，释放DNA （核物质）方法：将 5 ～ 10mL 鸡血细胞液加入 20mL 中；用玻棒搅拌5min ；用3 ～ 4 纱布过滤，以除去颗粒较大的杂质过滤；收集 目的：破坏细胞，释放核物质注意：搅拌不能用力过大，以防止打碎 DNA 分子；DNA 存在：多数与蛋白质结合，存在于滤液中② 溶解细胞核内 DNA方法：向滤液中加入物质的量浓度为 NaCl 溶液，搅拌 1min ；过滤获取 目的：使与 DNA 结合的核蛋白解聚，释放出DNA ；DNA 溶解于高溶液 NaCl溶液中注意：按同一方向搅拌③DNA析出方法：沿烧杯壁向滤液中缓慢加入 ，并轻轻按同一方向搅拌，使DNA 析出，直到丝状物不再增加；可以在玻棒上收集到黏稠物目的：降低 NaCl 溶液浓度达到 0.14mol/L 左右，使DNA 析出注意：加入的蒸馏水不能过多，使NaCl 溶液浓度过低，DNA 又会重新溶解黏稠物：丝状、略带黄色（DNA 分子上附着有少量蛋白质）④DNA 的初步纯化方法：向 2mol/LNaCl 溶液 20mL 中加入黏稠物，并按同一方向搅拌3min ，使DNA充分溶解；过滤，收集滤液；向滤液中贴壁缓慢加入50mL ，并用玻棒按同一方向缓慢、均匀地搅拌，在玻棒上收集白色丝状物（DNA ）原理： 原理：DNA 不溶于乙醇中，而蛋白质能溶于酒精方法：单向，快速，5min，力量不要过于猛烈，防治打碎 DNA。目的是加速血细胞破裂注意：鸡血细胞破碎以后释放出的 DNA，容易被玻璃容器吸附，所以在提取过程中为了减少 DNA的损失，最好使用塑料的烧杯和试管盛...
