四川省岳池县第一中学 2014-2015 学年高中生物 专题 5 课题 1 第 2课时 DNA 的粗提和鉴定课前预习学案 新人教版选修 1使用说明与学法指1.回顾 DNA 提取原理与选材2.掌握 DNA 提取过程与纯化及鉴定方法知识准备1.DNA 提取原理与选材2.提取生物大分子的一般思路教材助读一、DNA 的粗提取主要实验步骤(以鸡血红细胞为例)二、提取 DNA 的鉴定1、方法:① 取甲、乙两支试管,并向其中加入 5mL(等量)的 2mol/LNaCl 溶液;② 向甲试管中加入粗提取的 DNA,并搅拌使 DNA 溶解;③ 向两支试管中各加入 4mL(等量)二苯胺试剂,混匀,沸水中加热 5min,待试管冷却后,比较两支试管的颜色(蓝色)变化
2、注意点:实验中需要对照,目的:证明 三、知识注解 1、破碎细胞,释放 DNA动物:在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,使其吸水胀破,达到破碎细胞的目的
加入蒸馏水的同时,要用玻璃棒进行搅拌
1① 破碎细胞,释放DNA (核物质)方法:将 5 ~ 10mL 鸡血细胞液加入 20mL 中;用玻棒搅拌5min ;用3 ~ 4 纱布过滤,以除去颗粒较大的杂质过滤;收集 目的:破坏细胞,释放核物质注意:搅拌不能用力过大,以防止打碎 DNA 分子;DNA 存在:多数与蛋白质结合,存在于滤液中② 溶解细胞核内 DNA方法:向滤液中加入物质的量浓度为 NaCl 溶液,搅拌 1min ;过滤获取 目的:使与 DNA 结合的核蛋白解聚,释放出DNA ;DNA 溶解于高溶液 NaCl溶液中注意:按同一方向搅拌③DNA析出方法:沿烧杯壁向滤液中缓慢加入 ,并轻轻按同一方向搅拌,使DNA 析出,直到丝状物不再增加;可以在玻棒上收集到黏稠物目的:降低 NaCl 溶液浓度达到 0
14mol/L 左右,使DNA 析出注意:加入的蒸馏水不能过多,使NaCl 溶液浓度